Provádění experimentů s perfúzními plodinami

Pro udržení nezbytné teploty 37 ° C v nádobě na perfúzní plodinu se během provádění pokusů s plodinami v průběhu týdnů používá topná deska (MEDAX-Nagel, Kiel, Německo) a víko (není zobrazeno) (obrázek 5, 7). Transport kultivačního média se nejlépe provádí pomocí pomalu rotujícího peristaltického čerpadla (ISMATEC, IPC N8, Wertheim, Německo). Je schopen dodávat nastavitelné a přesné dávky čerpadla mezi 0,1 a 5 ml za hodinu.

Při průchodu ze skladovací láhve přes perfuzní kultivační médium se transportuje podél namontovaného tkáňového nosiče, aby se zajistily obsažené buňky. Přesné geometrické umístění tkáňového nosiče v nádobě na perfúzní plodinu zaručuje během přepravy média zajištění vždy čerstvé výživy a dýchacího plynu ze všech stran. Zároveň zabraňuje nefyziologické akumulaci metabolických produktů a překročení parakrinních faktorů. Pro udržení tohoto kontrolovaného prostředí po celou dobu plodiny se metabolizované médium shromažďuje do samostatné odpadní láhve. Ve skutečnosti není médium recirkulováno.

Obrázek 216A | Obrázek 7: Sestava perfuzní plodiny s epitelem uvnitř gradientní perfuzní kultivační nádoby. Termo deska udržuje požadovanou teplotu 37 ° C. Pro zajištění luminální a bazální strany obsaženého epitelu výživným a respiračním plynem dva kanály peristaltické pumpy transportují červené a čiré médium přesně stejnou rychlostí 1,25 ml / h ze skladovací láhve (levá strana) do odpadní láhev (pravá strana). Pro odstranění plynných bublin během transportu média je před gradientový kontejner umístěn modul expandéru plynu. | Tonmaurer / CC BY-SA (https://creativecommons.org/licenses/by-sa/3.0/legalcode) | Page URL : (https://commons.wikimedia.org/wiki/File:Minusheet_Figure_7.jpg) from Wikimedia Commons

Obrázek 216A | Obrázek 7: Sestava perfuzní plodiny s epitelem uvnitř gradientní perfuzní kultivační nádoby. Termo deska udržuje požadovanou teplotu 37 ° C. Pro zajištění luminální a bazální strany obsaženého epitelu výživným a respiračním plynem dva kanály peristaltické pumpy transportují červené a čiré médium přesně stejnou rychlostí 1,25 ml / h ze skladovací láhve (levá strana) do odpadní láhev (pravá strana). Pro odstranění plynných bublin během transportu média je před gradientový kontejner umístěn modul expandéru plynu. | Tonmaurer / CC BY-SA (https://creativecommons.org/licenses/by-sa/3.0/legalcode) | Page URL : (https://commons.wikimedia.org/wiki/File:Minusheet_Figure_7.jpg) from Wikimedia Commons

Autor : Milos Pawlowski

Reference:

Techniky molekulární biologie II

Nástroje molekulární biologie V

Komentáře