Kombinatorická mutageneze je technikou proteinového inženýrství zaměřená na místo, přičemž na základě zkoumání účinků aditivních individuálních mutací může být současně vytvořeno více mutantů proteinu. Poskytuje užitečnou akci k posouzení kombinatorického nárůstu velkého počtu mutací na proteinové službě. Velké množství mutantů lze skrínovat na určitou charakteristiku kombinačním vyšetřením. V této technice lze více pozic nebo krátkých sekvencí podél řetězce DNA důkladně modifikovat, aby se získala komplexní knihovna mutantních proteinů. Míra výskytu prospěšných variant může být zlepšena odlišnými metodami pro konstrukci knihoven mutageneze. Jeden tah blízko této techniky je vytlačit a nahradit část DNA zřetězení s knihovnou sekvencí obsahujících všechny možné kombinace na požadovaném místě mutace. Obsah vloženého segmentu může zahrnovat sekvence strukturního významu, imunogenní vlastnosti nebo enzymatickou službu. Segment může být navíc vložen do genu náhodně v regulaci, aby se vyhodnotil strukturální nebo funkční význam určité části proteinu.
Obrázek 223A | Mutace nasycení místa je typem místně zaměřené mutageneze. Tento obrázek ukazuje saturační mutagenezi jedné polohy v teoretickém 10-zbytkovém proteinu. Verze divokého typu proteinu je zobrazena nahoře, přičemž M představuje první aminokyselinu methionin a * představuje ukončení translace. Všech 19 mutantů isoleucinu v poloze 5 je uvedeno níže. | Rob Hurt / Attribution-Share Alike 4.0 International | Page URL : (https://commons.wikimedia.org/wiki/File:Site_saturation_mutagenesis.pdf) from Wikimedia Commons
Autor : Milos Pawlowski
Komentáře
Okomentovat