Meganukleázy byly poprvé použity v savčích buňkách v roce 1988. Meganukleázy jsou endodeoxyribonukleázy, které fungují jako restrikční enzymy s dlouhými rozpoznávacími místy, díky nimž jsou specifičtější pro své cílové místo než jiné restrikční enzymy. To zvyšuje jejich specifičnost a snižuje jejich toxicitu, protože nebudou cílit tolik míst v genomu. Nejstudovanější meganukleázy jsou rodina LAGLIDADG. Zatímco meganukleázy jsou dosud velmi citlivé na vazbu mimo cíl, což je činí méně atraktivními než jiné nástroje pro editaci genů, jejich menší velikost je přesto činí atraktivními zejména pro perspektivy virové vektorizace.
Nukleázy zinku a prstu (ZFN), používané poprvé v roce 1996, se obvykle vytvářejí fúzí domén zinku a prstu FokI. ZFN tedy mají schopnost štěpit DNA na objektivních místech. Vytvořením domény zinkového prstu zacílení na konkrétní místo v genomu je možné upravit genomické zřetězení na požadovaném místě. ZFN mají větší specificitu, ale přesto mají potenciál vázat se na nespecifické sekvence. Zatímco určité množství štěpení mimo cíl je přijatelné pro vytvoření transgenních modelových organismů, jejich účinnost není optimální pro všechny ošetření lidskou genovou terapií.
Obrázek 101A | Vazba ASO sondy "S" na "S" DNA (nahoře) nebo "A" DNA (dole). | PaleWhaleGail na anglické Wikipedii / CC BY-SA (https://creativecommons.org/licenses/by-sa/3.0/legalcode) | Page URL : (https://commons.wikimedia.org/wiki/File:Allele-specific_oligonucleotide_(sample).jpg) z Wikimedia Commons | URL: von Wikimedia Commons.
Autor : John Kaisermann
Komentáře
Okomentovat