Ukázalo se, že statické prostředí v 24-ti jamkové kultivační desce vede ke snížení výživy a hormonů, nekontrolovatelnému zvýšení metabolitů a překročení parakrinních faktorů v průběhu času. Z těchto důvodů se nosič tkáně Minusheet s adherentními buňkami používá pouze po krátkou dobu naočkování buněk do 24-ti jamkové kultivační destičky. Ve skutečnosti je tkáňový nosič po adhezi buněk přenesen do perfúzního kultivačního kontejneru, aby nabídl dynamickou tekutinu životní prostředí. Aby se vyhovělo individuálním požadavkům specializovaných tkání, byla zkonstruována řada perfuzních kontejnerů na plodiny (obrázek 3).
Každý z perfuzních zásobníků na plodiny má alespoň jeden vstup a jeden výstup pro transport živného média. Základní verze kontejneru umožňuje jednoduché koupání buněk respektive rostoucích tkání při nepřetržitém transportu média (obrázek 4a). V gradientním kontejneru je tkáňový nosič umístěn mezi základnu a víko, takže obě strany mohou být opatřeny individuálním médiem napodobujícím typické prostředí pro epitel (obrázek 4b). Nádoba na plodinu je navíc vyrobena z průhledného víka a základny umožňující mikroskopické poznámky během vývoje tkáně (obrázek 4c).
Obrázek 216A | Obrázek 7: Sestava perfuzní plodiny s epitelem uvnitř gradientní perfuzní kultivační nádoby. Termo deska udržuje požadovanou teplotu 37 ° C. Pro zajištění luminální a bazální strany obsaženého epitelu výživným a respiračním plynem dva kanály peristaltické pumpy transportují červené a čiré médium přesně stejnou rychlostí 1,25 ml / h ze skladovací láhve (levá strana) do odpadní láhev (pravá strana). Pro odstranění plynných bublin během transportu média je před gradientový kontejner umístěn modul expandéru plynu. | Tonmaurer / CC BY-SA (https://creativecommons.org/licenses/by-sa/3.0/legalcode) | Page URL : (https://commons.wikimedia.org/wiki/File:Minusheet_Figure_7.jpg) from Wikimedia Commons
Autor : Milos Pawlowski
Komentáře
Okomentovat